DBS 干血斑应用特集 1: 犬焦虫病

明媚的春日是带狗狗外出玩耍的好时机,它们在草地上奔跑,在灌木丛中互相嬉戏,追逐小球、飞盘,享受新鲜空气和自由的感觉。但是春天气温转暖,野外的各种虫子也开始蠢蠢欲动,如果您的狗狗外出回家变得格外烦躁和不舒服,经常抓挠或者不停地舔自己的皮肤,那么很可能它换上了犬焦虫症!

什么是犬焦虫病?

焦虫 (Babesia) 是一种血液寄生虫,可以寄生在犬的红细胞内,引起溶血性贫血和其他临床症状。焦虫病主要通过蜱虫叮咬传播,也可以通过输血、垂直传播 (从母狗到幼犬) 以及罕见的经粘膜传播途径感染犬。

当焦虫侵入狗的血液中,虽然犬的免疫系统能杀死一部分焦虫,但焦虫能进行分裂繁殖,并让被感染的狗成为慢性带原者。这也是犬焦虫症通常具有潜伏期的原因,快则一、两个月就会发病,慢则半年之后才发病。

犬焦虫病发病的
三个阶段

潜伏期

无异常反应与现象,但体内的红血球在缓慢崩解,红血球数值偏低。

发病初期

厌食、精神不济、毛色暗淡,肝、脾肿大,口腔黏膜苍白,尿液类似乌龙茶的深色。

发病后期

瘫痪、红血球快速崩解,随时有生命危险,必须马上输血抢救。

预防和早期诊断是
应对焦虫症的最佳方法

预防蜱虫叮咬主要包括: 定期使用驱虫药品、避免带狗狗到蚊虫较多的草地、户外活动结束后检查狗狗身上是否有蜱虫躲藏。

由于焦虫症通常具有潜伏期,症状并不明显,因此定期为狗狗做相关的检测是防治犬焦虫病的关键!

检测方案:
DBS 干血斑 方便的血样采集

目前检测犬焦虫病最准确和灵敏的方法是 PCR 法 (聚合酶链反应),需要在诊所由医师抽取狗狗的静脉血液进行采样。静脉取血的取血量大,且过程比较复杂,需要动物医师具有丰富的经验和饲主的配合。取血过程中,狗狗往往会出现抵触情绪,有时甚至会受到惊吓。

干血斑 (Dried blood spots, DBS) 是一种新型的血液采集和储存方法。它将微升级末梢血采集到样品卡上,干燥后形成斑点。该方法采样过程简单方便,饲主可自行操作;侵入性小,特别适合对小型动物 / 宠物和实验动物进行血样采集。相比于液态血,固态的干血斑具备更好的稳定性和生物安全性,可实现样品的常温运输,更可以以更温和的条件储存样品,构建生物样本库。

简单血样采集步骤

1. 饲主自行采样
2. 邮寄样品
3. 检测
4. 诊断治疗

DBS 干血斑应用案例:
早期诊断犬焦虫症

样本

宠物医院采集的犬类干血斑 (每个干血斑只需一滴全血,约 20 微升) 

检测目标

小焦虫 (Babesia gibsoni) 特异性基因 (PCR 引物由客户提供)。

卡片

Ahlstrom AutoCollectTM 

样本运输条件

室温

提取方法

直接提取,未纯化 

检测方法

PCR (聚合酶链反应),琼脂凝胶电泳

结果

通过 DBS 干血斑微量采样,所有犬干血斑的阳性和阴性样本均能被正确检出,说明干血斑可以应用于犬焦虫病的早期诊断。其方便、微量的采血和样本室温运输的特点使其在宠物疾病快速诊断领域具有巨大的发展潜力。

同期加推

第十五届东西部小动物临床兽医师大会,集合由 57 个省市小动物兽医师学(协)会的力量,共同举办。大会旨在推动中国小动物临床兽医技术与国际接轨,提升中国小动物兽医师的整体水平,推广世界先进小动物诊疗技术,展示国际领先的宠物医疗设备、宠物药品、饲料及试剂等。

大会将于 2023 年 5 月 23 日 – 25 日在青岛举行,力扬将参展此次盛会,推出 CAMAG 全自动干血斑萃取系统 DBS-MS 500,从自动化方向对传统干血斑技术进行的一次全面升级,可实现全自动、快速、无人值守的干血斑样品制备,并可结合质谱、PCR、NGS 测序及 ELISA 等检测技术,应用于以下领域:

  • 健康生物标记物检测
  • 治疗药物监测
  • 基因组检测
  • 感染检测
  • 生物样本库
  • 药物的临床前试验
  • 食品安全
全自动干血斑萃取系统
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