制备新思路:活性导向+靶标分离

发布日期: 2017 年 11 月 28 日

在科技飞速发展的今天,盲目分离化学单体,只求数量的时代已经过去。高效率的时代讲求的是有的放矢的精准科学研究。活性导向+靶标分离成为越来越广泛的研究模式。

以块传统草药根糙苏为例,来具体了解运用该策略实现对天然活性产物实现快速分离和α-葡萄糖苷酶抑制活性实现快速筛查的应用方案:

块根糙苏 (Phlomis tuberosa L.) 是一种多年生草本植物,在中国、蒙古及中亚、欧洲等地分布广泛,也是使用历史十分悠久的中草药,在亚洲国家被广泛应用于糖尿病,胃溃疡等病症的治疗,有着十分显著的临床效果。经过进一步研究报道,其作用机制与酶活性抑制相关,因此筛选确定其活性成分便是深入研究的重中之重。但是,如何快速确定活性成分?以及确定活性成分后又如何快速富集目标化合物?等等一些问题成为了进一步深入研究的首道屏障。

然而,Sepbox 2D-2000 SPE-HPLC 二维全自动分离制备系统与薄层生物自显影方法联用,为世界提供一种全新的策略。两种方法的联用,可以实现粗提取物中各成分的活性的快速筛查,以帮助快速、精确地确定药物中的活性成分目标。

活性导向+靶标分离方案如下:
  1. 分离制备时间:仪器全自动运行,过程大约维持 20 小时作用,全自动化确保其精确与高效。
  2. 分离结果:得到 150 个分馏数,用于测定分析。
  3. TLC 生物自显影活性筛查结果:具有a-葡萄糖苷酶抑制活性的馏分 15 个。
  4. 活性馏分纯化鉴定结果:得到 20 个有效化合物,其中 4 个新化合物,1 个新天然产物。

最终,通过 Sepbox 2D-2000 全自动 HPLC-SPE-HPLC 分离制备系统 20 小时的自动运转,我们快速得到 150 个馏分。而后,再于薄层色谱生物自显影活性筛查模型上对这 150 个馏分进行快速筛查,发现其中 15 个馏分对比阳性对照具有明显的抑制活性。

紧接着,再对 15 个馏分进行细分纯化以及结构鉴定,最终得到 20 个活性化合物。最为关键的是,从粗提物到得到活性单体,工作周期不超过 5 个工作日,这大大降低了其时间成本,为科学研究提供了良好的基础,效率提升极为显著。

Sepbox全自动分离制备系统,以活性为导向,实现靶标分离,助力于快速分离研究,为研发建立了一种全新的思路,其潜力巨大,影响深远,必将在未来的科学行业起到更为关键的作用。

参考文献:

[1] Baatar D, et al., Ethanol Extract of Phlomis Tuberosa L. Promotes Glucose Uptake in 3T3-L1 Preadipocytes via Insulin Signaling Pathway, The FASEB Journal, April 2017 31(9). doi: 10.1096/fj.1530-6860.

[2] Yingbo Y, et al., Identification of α-Glucosidase Inhibitors from Phlomis tuberosa, PLoS ONE 10(2), February 6, 2015. doi: 10.1371/journal.pone.0116922.